最完整深入的PCR相关知识大全
本文导览
初级- 什么是PCR？
PCR的历史
PCR反应体系中的6大关键组分
进阶 - 全面了解
10种常用的PCR方法
盘点PCR的七大应用领域
高阶 - 深入应用
等温扩增
直接PCR
如何选择合适的
PCR仪 PCR酶 PCR耗材
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初 级 版
PCR基础知识
PCR（Polymerase Chain Reaction），中文全称为聚合酶链式反应，是分子生物学研究中最为广泛应用的技术。在70年代的时候首次报道使用聚合酶及合成引物进行单链DNA的扩增，但直到1983年才正式作为一种研究工具用于DNA的扩增。
PCR可在短时间内将单个DNA扩增得到成千上万个拷贝。其过程主要由3步组成：
（1）变性，双链DNA经加热变成单链DNA；
（2）退火，引物与模板的侧翼区结合；
（3）延伸，DNA聚合酶沿着模板，将引物的3’端延伸。
PCR反应体系中的6大关键组分
PCR的成功取决于很多因素，其反应组分在扩增中起着至关重要的作用。这篇文章分析了模板DNA、DNA聚合酶、引物、dNTP、Mg2+和缓冲液这六大组分，是如何影响PCR实验结果的。
进 阶 版
PCR绝不是想象的那么简单，包括热启动PCR（Hot Start PCR）、快速PCR（Fast PCR）、直接PCR（Direct PCR）、多重PCR（Multiplex PCR）、定量PCR（Quantitative PCR）在内，这篇文章整理了10种常用的PCR方法，不断改进的PCR方法和DNA聚合酶，大大提高了PCR扩增的结果。
20世纪70年代，研究人员首次报道使用合成引物和DNA聚合酶从模板复制单链DNA；1983年，Kary Mullis发明出用于扩增目标DNA的研究工具，如今，PCR成为分子生物学研究必不可少的一部分，被广泛应用于基础研究、疾病诊断、农业检测和法医调查等领域。
这篇文章整理了PCR在基因表达、基因分型、分子克隆、突变、甲基化、测序、医学法医学和应用科学各方面的原理和特点，帮你更全面的了解PCR的作用。
高 阶 版
等温扩增
PCR（聚合酶链式反应）已经成为分子生物学研究中最闪亮的明星。除了常见的PCR扩增方法，还有一个新兴的扩增技术—等温扩增。等温扩增基于其强劲的扩增能力，可在恒温下对核酸进行指数扩增，而无需热循环仪。等温扩增技术适合用于病原体检测、痕量DNA的扩增，其灵敏度与其它PCR技术相当甚至更加灵敏
这篇文章比较了等温扩增和普通PCR的特征与差异。
直接PCR
直接PCR（Direct PCR）即直接用未纯化的样本进行PCR扩增，无需核酸纯化步骤，只需微量的原始样本作为PCR反应的模板，为DNA扩增带来前所未有的便捷，节约了大量时间和成本。
这篇文章讲解了如何摆脱PCR抑制剂的困扰、选择直接PCR扩增的实验方案，并讨论了实验结果数据。
如何选择合适的：
PCR仪？
不同型号和生产厂商的PCR仪可能会展现出不同的性能和可重复性。 这些不同不仅会影响PCR效率也会对获取数据的准确性和一致性造成影响。 过度使用的PCR仪的可靠性，以及当问题出现时可提供的支持，都是在进行PCR仪选择时需要考虑的重要方面。
因此，了解可影响PCR结果的PCR仪特点可帮助我们最大程度实现实验的成功。这篇文章整理了包括加热模块之间温度、梯度温度控制等六大贴士，帮你选择最适合的PCR仪。
PCR酶？
PCR 酶数量如此之多，选择正确的酶可能是一项挑战。用于扩增 DNA 的各种酶的保真性、扩增速度和特异性各不相同。
您需要确保序列准确性吗？
您是否正在使用长链 DNA 模板，还是希望缩短循环时间？
是否遇到了非特异性扩增的问题？
这篇文章通过以上3个问题，帮助您解答选择 PCR 酶时需要重点关注的因素。
PCR耗材？
PCR是一种敏感和有效的方法，用于在短时间内将单拷贝的目标DNA序列扩增至数百万拷贝。因此用于PCR反应的塑料耗材必须避免存在污染物和抑制剂，同时又具有可保障最佳PCR效果的高质量。
这篇文章解读了常用的PCR / qPCR耗材相关的特性和术语，帮助选择最适合的耗材以获得准确可靠的实验数据。
针对Applied Biosystems 荧光定量PCR仪器，这篇文章介绍了如何挑选具有最佳的适用性Applied Biosystems MicroAmp PCR耗材。
针对自动移液工作站的高通量自动化PCR，这篇文章介绍了专为自动化设计的Applied Biosystems MicroAmp EnduraPlates和Thermo Scientific Armadillo PCR反应板。